生物安全柜的使用及維護

(一) 準備工作
1.在開(kāi)始工作以前，要清除生物安全柜內表面的污染。
2.將所有必需的物品置于安全柜內，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開(kāi)口的次數。物品放置要注意以下幾點(diǎn)：
①I(mǎi)I級生物安全柜臺面前面和后面的進(jìn)氣格柵不能被物品阻擋。
②所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會(huì )阻擋后部格柵。
③可產(chǎn)生氣溶膠的設備(如：混勻器、離心機等)應靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子等體積較大的物品，應該放在安全柜內的某一側。
④潔凈的物品應放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外，降低交叉污染的可能性。
⑤容易受紫外線(xiàn)損傷的實(shí)驗樣本可以在紫外線(xiàn)殺菌后的實(shí)驗之前放入。
⑥不要在工作區內排放過(guò)多的物品。
3.關(guān)閉操作前窗，打開(kāi)生物安全柜的紫外燈，對生物安全柜工作臺面，側壁表面以及后壁內側進(jìn)行殺菌處理。
4.稍微打開(kāi)操作前窗，讓生物安全柜工作區排氣幾分鐘之后再開(kāi)始工作。


(二) 操作注意事項
1.在使用生物安全柜時(shí)應穿著(zhù)個(gè)體防護服并戴手套防止被污染。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時(shí)，可穿著(zhù)普通實(shí)驗服。手套應套在實(shí)驗服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護目鏡。
2.在生物安全柜內，避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會(huì )對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理?yè)]發(fā)性物品和易燃物品時(shí)，也易造成危險。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用紅外線(xiàn)電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán)。
3.手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過(guò)”手和雙臂的表面以后，才可以開(kāi)始對物品進(jìn)行處理。
4.工作時(shí)，盡量減少手臂的移動(dòng)，移動(dòng)時(shí)要緩慢，防止干擾柜內氣流。在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開(kāi)口處氣流的完整性，雙臂應該與工作區開(kāi)口垂直地緩慢進(jìn)出前面的開(kāi)口。
5.在工作臺面上的實(shí)驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進(jìn)行，所有操作在工作臺面的中后部進(jìn)行。
6.工作時(shí)，耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)放在安全柜內不能拿出安全柜，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會(huì )干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護。
7.一旦實(shí)驗過(guò)程中產(chǎn)生溢灑物，用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
8.盡量使安全柜處于持續工作狀態(tài)，并對所有物品進(jìn)行表面消毒處理，提供大程度的人員保護。從安全柜內部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時(shí)，要進(jìn)行表面消毒處理。

(三)使用完畢后的處理
1.系緊用過(guò)的生物廢物袋。
2.對安全柜內壁、后壁、工作臺面和前窗內側進(jìn)行清潔和消毒處理。
3.由于剩余的培養基可能會(huì )使微生物生長(cháng)繁殖，因此在實(shí)驗結束時(shí)，包括儀器設備在內的所有物品都應清除表面污染，并移出安全柜。
4.從安全柜內移出手臂之前，要進(jìn)行表面消毒處理，然后垂直于工作區開(kāi)口緩慢地移出。
6.在每次使用后，要清除生物安全柜內表面的污染。工作臺面和內壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實(shí)驗結束時(shí)，應擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內外側等部位來(lái)清除表面的污染。在對目標生物體有效時(shí)，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來(lái)消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭。
7.關(guān)閉前操作窗口并開(kāi)啟紫外燈。